1.生物技术构成:由多学科综合而成的一门交叉学科,涉及微生物学、生物化学、细胞生物学、免疫学、遗传学、分子生物学和化学工程等学科目前认为生物技术主要由基因工程、蛋白质工程、细胞工程、酶工程、发酵工程组成。
2.食品生物技术特征:食品生物技术包括食品发酵和酿造等最古老的生物技术加工过程,也包括应用现代生物技术来改良食品原料加工品质的基因、生产高质量的农产品、制造食品添加剂、植物和动物细胞的培养以及与食品加工和制造相关的其他生物技术,例如:酶工程、发酵工程、基因工程,以及下游分离加工技术等。
11.酶工程:利用酶催化作用,在一定的生物反应器中,将相应原料转化成所需要产品的过程,它是酶学理论、基因工程、蛋白质工程与发酵工程相结合而形成的一门新技术。
12.发酵工程:是一门利用微生物的生长和代谢活动来生产各种有用物质的工程技术,由于它的主体是微生物,又称为微生物工程。
13.发酵食品:是一类通过发酵手段生产出来的一类产品,或在该产品的某一阶段采用了发酵手段。发酵技术在这类食品的生产过程中有时是主要作用,有时只是辅助作用。
10.载体具有的特征:①都能在宿主细胞中独立复制;②都能专一性地感染某一细胞,如大肠杆菌、酵母等;③都具有某种选择性的标记,易识别和筛选。如耐某种抗生素的基因(耐氨苄青霉素、耐四环素等):④都具有一些内切酶的位点;⑤可插入一段较大的外源DNA,而不影响其本身的复制。
11.cDNA文库构建基本步骤:①分离细胞总RNA,然后从总RNA中分离出mRNA部分;②经过逆转录合成第一链cDNA;③将mRNA—DNA杂交分子转变为双链cDNA分子;④将合成的双链cDNA重组到质粒载体或噬菌体载体上,导入大肠杆菌寄主细胞增值。
8.细胞工程:在细胞水平上研究开发、利用各类细胞的工程,是人们利用现代分子生物学和现代细胞分子学的研究成果,根据人们的需求设计改变细胞的遗传基础,通过细胞培养、细胞融合等技术大量培养细胞乃至完整生物个体的技术。
9.细胞周期:正常分裂的细胞从前一次分裂结束到下一次分裂完成所经历连续动态过程。
10.细胞融合:两种不同亲株的细胞经酶法除去细胞壁后,得到两个球状原生质体置于高渗溶液中,采用生物法、化学法或电处理法,促使两者互相凝集并发生细胞之间的融合,进而导致基因重组,获得新的细胞。
6.基因工程的主要研究内容:①从复杂的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等步骤LDsports乐动体育,分离出带有目的基因的DNA片段;②在体外,将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制并具有选择记号的载体分子上,形成重组DNA分子;③重组DNA分子转移到适当的受体细胞,并之一起增殖;④从大量的细胞繁殖群体中,筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆;⑤筛选出含有目的基因的受体细胞克隆,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究使用;⑥将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。
21.动物细胞培养方法:①悬浮培养:②贴壁培养;③固定化培养;④大规模培养(包括空心纤维法,微载体法LDsports乐动体育,微胶囊法)。
23.影响动物细胞生长的因素:①温度;②pH值;③营养成分,④溶解氧及气体环境。
按技术分:①组织与细胞培养技术;②细胞大量培养技术;③细胞器移植技术;④DNA重组技术;⑤外源基因导入技术;⑥细胞融合技术;⑦体外受精和胚胎移植技术;⑧染色体工程技术。
15.细胞工程的基本技术:①无菌操作技术;②细胞培养技术(包括植物细胞培养技术和动物细胞培养技术);③细胞融合技术(有生物学法,化学融合剂法,电处理融合法)。
4.基因工程理论三大发现:①40年代确定了遗传信息的携带者(即基因的分子载体)是DNA(脱氧核糖核酸)而不是蛋白质,从而明确了遗传的物质基础问题;②在50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机理,解决了基因的自我复制和传递的问题;③在50年代期末和60年代,相继提出了“中心法则”和操纵子学说,并成功的破译了遗传密码,从而阐明了遗传信息的流向和表达问题。
38.发酵工程的应用范围:①微生物菌体的利用和生产;②微生物代谢产物利用;③微生物技能的利用。
7.基因工程的基本技术:①总DNA的提取;②RNA的提取(异硫氰酸胍—氯化铯超速离心法,盐酸胍—有机溶剂法,氯化锂—尿素法,一步快速热酚抽提法);③质粒DNA的提取(两种纯化方法:聚乙二醇沉淀法,氯化铯密度梯度离心法)
9.载体种类:①质粒载体(能自主复制的双链环状DNA分子,它们在细菌中以独立于染色体之外的方式存在),②λ噬菌体,③柯斯质粒。
20.絮凝分离技术:是利用絮凝作用把溶液中的微小胶体、颗粒及悬浮物除去并分离的技术。
21.浓差极化:指外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜,而大分子被截留于膜表面,并逐渐形成浓度梯度的现象。
22.超临界流体:是指处于临界温度和临界压力以上,其物理性质介于气液之间的流体,这种流体兼有气液两重性的特点,既有与气体相当的高渗透能力和低的粘度,又兼有与液体相近的密度和优良的溶解能力。
5.基因工程技术上的三大发明:①DNA分子的体外切割与连接技术是基因工程诞生的第一个技术发明——工具酶的发现;②基因工程载体的使用是基因工程诞生的第二项技术发明——载体的应用;③DNA分子的核苷酸序列分析技术、琼脂糖凝胶电泳和southern转移杂交等技术的发展对于基因工程的开展都起到了促进的作用。
17.动植LDsports乐动体育物原生质体制备过程:①取材与除菌;②酶解;③分离;④洗涤;⑤鉴定。
18.微生物原生质体制备过程:①筛选标记和稳定性鉴定;②原生质体的制备与再生;③原生质体融合。
19.植物细胞培养特性:①植物细胞本身特性;②植物细胞培养液的流变特性;③植物细胞培养过程中气体传递9氧的传递和CO2的影响);④泡沫与器壁表面粘附性;⑤细胞分裂与愈伤组织的形成。
4.PCR技术:聚合酶链式反应,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,故又称基因的体外扩增法。
5.载体:基因克隆载体是指用来进行基因组克隆、cDNA克隆或亚克隆的DNA。
7.转基因食品:利用基因工程技术对食品资源的改造主要涉及到对植物性资源和动物性资源的改造,通过对被加工材料的处理,生产出符合人类需要的基因工程食品。
30.发酵法对生产菌的要求:①安全可靠,不是致病菌,不产有毒物质;②产酶性能稳定,不易退化,不易感染噬菌体;③酶产量高;④能利用廉价原料,发酵周期短,易培养;⑤酶产品易于分离纯化,最好产生胞外酶。
31.固定化细胞发酵的优点:①固定化细胞的密度较高,反应器生产强度较大,可提高生产效率;②发酵稳定性好,可反复或连续较长时间LDsports乐动体育使用,易于连续化、自动化生产;③细胞固定在载体上流失少,可在高稀释率下连续发酵,设备利用率提高;④发酵液中含菌体较少,利于产品分离纯化。
3.食品生物技术研究内容:①通过基因工程和细胞工程改善食品原料农产品的品质和提高产量。例如,耐贮藏番茄;②利用基因工程、发酵工程生产用于农产品保鲜的“绿色”抗氧化剂、防腐剂等:③通过基因工程、发酵工程、酶工程和蛋白质工程使食品加工工艺高效化,提高食品的附加值LDsports乐动体育,提高农产品的利用率,以及提高食品的保健功能。例如,酶制剂;④利用基因工程、酶工程、和发酵工程、减少食品的损失、提高食品质量管理的效率和保证食品质量和安全性;⑤通过发酵工程和酶工程处理废弃物,提高资源的利用率,并减少环境污染。
12.转基因在食品工业中的应用:①改良食品生产的原料:改良植物性食品原料;动物性资源的改造;②改良微生物菌种的性能:乳酸菌;酵母菌;产酶微生物;③采用基因工程菌生产的酶制剂:产TG基因工程菌的构建;凝乳基因工程菌的构建)。
13.食品加工工艺的改良方向:①提高加工中的牛乳热稳定性;②改良大卖的蛋白质;③生产保健食品有效成分的改良。
18.糖代Fra Baidu bibliotek:酵母通过糖酵解途径(EMP途径)将葡萄糖降解成丙酮酸,在有氧条件下,丙酮酸经TCA循环、呼吸链氧化,被氧化生成二氧化碳和水,过程中有许多ATP及中间代谢产物生成。在厌氧发酵时,丙酮酸先脱羧生成乙醛,后者在乙醇脱氢酶催化下,还原成乙醇。
19.细胞破碎:用一定方法(机械法、物理法、化学法、酶法等)打开细胞壁或膜,使细胞的内含物有效地释放出来。
1.生物技术:利用生物体系,应用先进的生物学技和工程技术,加工或不加工底物原料,以提供所需的各种产品或达到某种目的的一门新型跨学科技术。
2.食品生物技术:食品生物技术是生物技术在食品生产原料、加工和制造中应用的一个学科。
3.基因工程:基因工程是对DNA大分子上的遗传单元(基因)进行体外操作,把不同来源的基因按照单元设计的蓝图,重新构成新的基因组合(即重组体),再把它引入细胞中,构成具有新的遗传特性的生物技术。
24.动物细胞工程的应用:口蹄疫苗,狂犬病毒疫苗,牛白血病疫苗,骨髓灰质炎病毒疫苗,乙型肝炎病毒疫苗,血纤维素蛋白溶酶原激活剂;单克隆抗体。
25.酶工程分类:①化学酶工程:指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用,由酶学原理与化工技术相互渗透、结合而形成;②生物酶工程:酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物技术结合的产物。
34.酶的提取或萃取:①水溶液提取;②有机溶液提取(乙醇、丙酮、丁醇)。
35.固定化酶和固定化细胞制备方法:①载体结合法:包括物理吸附法,离子吸附法,共价键结合法(有重氮法,,叠氮法,溴化氰法,烷基化和芳基化法);②交联法;③包埋法(包括凝胶包埋法和微胶囊包埋法)。
37.固定化酶的性质:①固定化后酶活力和专一性会发生变化;②固定化酶的稳定性会提高;③最适温度发生变化;④最适pH发生变化:载体带负电,最适pH向碱性方向移动;载体带正电,最适pH向酸性方向移动;载体不带电,最适pH不变;⑤第五的特异性发生变化。
14.化学酶工程:指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用,由酶学原理与化工技术相互渗透、结合而形成。
15.生物酶工程:是酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术结合的产物。
17.物理吸附法:通过氢键和派电子亲和力等物理作用,将酶或含酶菌体吸附在固体吸附剂表面而使酶固定化的方法。
27.发酵方法:①固态发酵,②液态发酵法;③固定化细胞发酵;④固定化原生质体发酵。
28.酶生物合成的3种调控模式:①诱导合成作用;②产物阻碍作用;③分解代谢物阻碍作用。
29.微生物发酵生产法优点:①微生物种类繁多,酶的品种齐全;②微生物繁殖快,生产周期短,酶的产量高;③培养微生物的原料廉价,生产成本低;④可通过诱变培育高产量的菌株,提高酶制剂得率;⑤基因重组、细胞融合技术按人类需要生产目的酶。
优点:①因解除了细胞壁这一扩散障碍,使胞内酶等胞内物质不断地分泌到胞外,可直接从发酵液中获得产品LDsports乐动体育;②使原来存在于细胞间质中的物质游离到发酵液中而成为胞外产物;③固定化原生质体有较好的稳定性,可反复或连续使用相当长时间。
缺点:①固定化原生质体的制备较复杂;②发酵培养基中需维持较高渗透压;③防止细胞壁的再生。
16.细胞融合方法:①生物学法:采用病毒促进细胞融合,如仙台病毒,疱疹病毒,天花病毒等;②化学融合剂法:PEG、DMSO、甘油醋酸酯、油酸盐及磷酯酰丝氨酸等脂类化合物,在Ca2存在下皆可促进细胞融合;③电处理融合:在高频电场脉冲条件下,细胞通透性增加而发生融合,属非专一性融合,存在双亲自体融合的问题。
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